产品概述
本试剂盒为血吸虫病原体核酸检测专用,基于荧光定量PCR(qPCR)或AFLP-PCR技术开发,适用于科研领域。核心特点包括高灵敏度、特异性及标准化操作流程,可检测血吸虫DNA/RNA,兼容主流荧光定量PCR仪。
技术参数
检测原理
染料法qPCR:采用优化引物及探针,靶向血吸虫高度保守基因区域,避免交叉反应。
AFLP-PCR:结合酶切、连接与扩增技术,适用于基因组多态性分析。
检测限与线性范围
标准曲线覆盖10E2–10E7拷贝/μL(6个10倍梯度稀释),阳性对照为非传染性DNA片段。
适用仪器
ABI系列、Bio-Rad系列、Roche LightCycler等多通道qPCR仪。
样本要求
样本类型:DNA或RNA(视具体指标而定)。
保存与运输:
短期保存于-20℃,长期建议-80℃;运输需冷冻条件,避免反复冻融。
操作时严格分区(样本处理、扩增区分离),防止交叉污染。
试剂盒组成
预混PCR Master Mix(含染料/探针)
阳性对照(非活性DNA标准品)
稀释缓冲液(TE或超纯水)
说明书
操作步骤
DNA提取
使用高纯度提取试剂,纯度直接影响检测灵敏度。
标准曲线制备
按梯度稀释阳性对照(独立操作区),标记离心管并加入缓冲液。
PCR扩增
按20–30μL体系配制反应液,加入模板后上机运行。程序包括预变性、扩增(40循环)、荧光采集。
结果分析
通过Ct值或电泳条带判定样本阳性/阴性。

注意事项
质量控制:每批次实验需包含阴性对照(无模板)及阳性对照。
安全防护:
底物避光保存,避免接触有毒试剂(如EB替代染料)。
使用一次性耗材,酶标板洗涤后充分拍干。
储存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
适用范围与限制
用途:仅限科研,不适用于临床诊断。
局限性:检测灵敏度依赖样本提取质量,低浓度样本需重复验证。
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