名称：TMB底物液，单组份底物液，单组份显色液，ELISA 底物显色液。
 
产品描述：
用于HRP标记的ELISA；单一组分，稳定，使用方便，灵敏度高。
主要成分是3,3’,5,5’–四甲基联苯胺（3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine(TMB)）,是辣根过氧化物酶（HRP）的底物，在辣根过氧化物酶的作用下，发生氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比，从而可以用于基于HRP标记物的检测。
 
规格： 10mL, 1000mL, 5000mL
 
保存及运输：
常温运输(勿超过30°C)，2-8°C储存12个月。
 
使用方法：
根据计划使用的数量，将该次需要的TMB显色液从大瓶转移的干净的避光小瓶中。后续从小瓶中取用
1) 加液：加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加TMB显色液100μL - 200μL。  
2) 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37°C下温育10-30分钟。
3) 终止：加50微升的2M盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
4) 读数：终止反应后30分钟内在450nm处读数。

如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物
 
注意事项:
1. 适用于HRP标记的ELISA实验，该底物中含TMB和过氧化氢，在HRP的作用下，被氧化形成水溶性蓝色产物，在370nm和650nm有吸收峰。进行动力学实验时，可直接检测650 nm的吸光度。由于蓝色会不断加深，推荐及时加入终止液，加入酸性终止液后溶液变成稳定的黄色，检测波长为450 nm，吸光度值可较不终止增加数倍且保持稳定。
2. 该底物对微量的HRP酶敏感，在使用过程中应避免污染，切忌将枪头直接插入大瓶中取液。一旦未使用的显色液变蓝了，说明试剂遭到污染，需停止使用。
3. 操作过程中避免阳光的直射，分装的容器建议用塑料容器，避免使用金属容器以及细菌和氧化还原剂污染的容器。
4. 大量分装时最好使用称重的方法或蠕动泵。
5. 过高浓度的HRP会导致TMB呈现绿色或红色，或终止后出现沉淀，应该减少抗体和标记物的用量或缩短孵育时间。
6. 本品的灵敏度和信号水平可能优于客户目前正在使用的显色液，为了减少阴阳性的误判，需调整阴阳性的判断标准以避免错判。
 
 
 

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