产品信息

货号	产品名称	规格	价格
M1115	Zeocin 博来霉素（溶液）	100mg	480
M1117	Zeocin 博来霉素（溶液）	10×100mg	4320
M1119	Zeocin 博来霉素（溶液）	50×100mg	16800
M1215	Zeocin 博来霉素（粉末）	1g	2755
M1217	Zeocin 博来霉素（粉末）	5g	10379

产品简介
Zeocin是腐草霉素D1（Phleomycin D1）的商业名称，其中文名称博来霉素是一种铜离子螯合的糖肽抗生素（来源于链霉菌Streptomyces verticillus的突变株），铜离子的存在使其呈蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。博来霉素是作用谱广泛，对细菌、真核微生物、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。博来霉素常用作一种非常有效的工具抗生素，用来筛选携带Sh ble抗性基因并能稳定表达分子量为13.665 kDa的一种博来霉素抗性蛋白的细胞株。博来霉素是的用量为 50-2000 ug/ml（通常 300 ug/ml），具体取决于细胞类型。
warbio公司提供无菌溶液形式的Zeocin，浓度是100mg/ml，使用起来更加方便，只需直接加入培养基到所需工作浓度即可。
产品性质
分子式（Formula）：C55H85O21N20S2Cu - HCl
Cas: 11006-33-0
分子量（Molecular Weight）：1535
外观（Appearance）：蓝色粉末
内毒素：＜1 EU/mg
纯度（Purity）：>90%(HLPC)
溶解性：易溶于水（>500 mg/ml）
细胞培养测试：在 Zeocin® 敏感和 Zeocin® 抗性哺乳动物细胞系中验证效力
微量污染物无细胞毒性：在抗 Zeocin® 细胞中证实不存在长期影响
应用参考浓度：
1）大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L）
2）酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基）
3）哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同）
使用步骤参考
一、细胞对Zeocin敏感性的确定（杀灭曲线建立）
重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。
加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基，Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。
每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最加工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin的最适浓度。
二、筛选稳定转染细胞系
转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。
转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。
转染48-72h后，用含有最加浓度Zeocin（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。
【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin能发挥作用，杀死细胞。
每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。
挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。
三、稳定转染细胞系的维持培养
可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：
1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；
2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；
3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】。
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货号	产品名称	规格	储存
M0943	潮霉素B Hyaromycin B	1g	650
M0942	潮霉素B（50 mg/ml）Hygromycin B (50 mg/ml)	1g	680
M9337	Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）（10 mg/ml）	5×10mg	2450
M0336	Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素（20 mg/ml）	20mg	921
M2150	Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐	25mg	678
CB937	Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素	1g	1868

注意事项：  
Zeocin™对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
运输与保存
储存在-30°C~-10°C，使用前需冰上融化。